关键词:丹参；干燥方法；有效成分含量
中药材丹参为唇形科植物丹参(Salviamiltiorrhiza Bunge)的干燥根及根茎[1].是一种常用中药,具有活血去瘀,消肿止痛,养血安神的功能.2000 年版药典丹参药材含量测定项目下仅收载了丹参酮ⅡA.但随着中药研究的深入发展,以及《中药材生产质量管理规范(GAP)》于2002 年6月1 日的正式实施,丹参药材中以丹酚酸B 为代表的水溶性成分的药理作用越来越多地引起人们的重视[2- 4].因此2005 年新版药典在丹参含量测定项目下新增了丹酚酸B.为适应药典新标准, 响应国家大力推行GAP 的号召,进一步完善丹参药材生产标准操作规程(Standard Operating Procedure,SOP),进行了本项研究.
1 试验材料与仪器
1.1 鲜丹参
采至陕西天士力植物药业有限公司药源基地杨峪河试验田(2003 年5 月15 日采,约10kg).
1.2 试剂
甲酸(分析纯,天津产)I提取用甲醇(分析纯,天津产)I色谱甲醇(美国产)I色谱乙腈(美国产)I水为去离子水(实验室自制).
1.3 标准品
丹参酮ⅡA、丹酚酸B 标准品均由中国药品生物制品检定所提供.
1.4 检测仪器
Agilent 1100 型高效液相色谱仪,具体配置如下:单元泵、自动进样器、VWD检测器、Auto Science 柱温箱、Kromasil C18(4.6mm ×250mm,5μm)色谱柱.
2 试验方法
2.1 试验材料分组
将采回鲜丹参除去泥土及地上部分后剪成长约五厘米的小段,混合均匀,用四分法等分为四组:第一组为阴干、第二组为晒干、第三组为50℃烘干、第四组为100℃烘干,每组两个重复.
2.2 检测方法
2.2.1 丹参酮ⅡA
色谱条件与系统适用性实验用十八烷基键合硅胶为填充剂,甲醇- 水(15:5)为流动相,检测波长为270nm,理论板数按丹参酮ⅡA 峰计算应不低于2000.
对照品溶液的制备精密称取丹参酮ⅡA 对照品10mg,置50mL棕色量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,精密量取2mL,置25mL 棕色量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得(每1mL 中含丹参酮ⅡA 16μg).
供试品溶液的制备取丹参样品粉末(过三号筛)0.3g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50mL,塞密,称定重量,加热回流1h,放冷,塞密,再次称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得.
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μL,注入高效液相色谱仪,根据峰面积进行计算,即得.
2.2.2 丹酚酸B
色谱条件与系统适用性实验用十八烷基键合硅胶为填充剂,甲醇- 乙腈- 甲酸- 水(30:10:1:59)为流动相,检测波长为286nm,理论板数按丹酚酸B 峰计算应不低于2000.
对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B 对照品适量,加75%甲醇制成每1mL 中含0.14mg 的溶液,即得.
供试品溶液的制备取丹参样品粉末(过三号筛)0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入75%甲醇50mL,塞密,称定重量,加热回流1h,放冷,塞密,再次称定重量,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得.
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入高效液相色谱仪,根据峰面积进行计算,即得.
3 数据记录
本次实验参照新版药典标准,以丹参酮ⅡA 和丹酚酸B 含量为指标评价各组处理,并对各试验组样品外观性状进行了比较.
4 结果与讨论
药典规定丹参药材栽培品性状为:表面红棕色,具纵皱,外皮紧贴不易剥落,质坚实,断面较平整,略呈角质样.由表1可知:阴干处理样品性状与药典要求最为接近.由表2 可知:100℃烘干处理样品丹参酮ⅡA 含量检测结果最高,其次为50℃烘干处理,晒干处理样品丹参酮ⅡA 含量最低:晒干处理样品丹酚酸B 含量检测结果最高,阴干处理样品含量略低于晒干处理,50℃次之,100℃处理样品中未检出丹酚酸B.
4.1 丹参酮ⅡA
丹参酮ⅡA 是丹参中主要的脂溶性有效成分,不仅具有天然抗氧化活性、天然心血管药理作用以及抗菌消炎作用,还具有明显的抗肿瘤作用[5].但丹参酮ⅡA 性质不稳定,在光照条件下易分解[6,7].因此,在各处理组中,晒干处理样品丹参酮ⅡA 含量最低.在避光的条件下(阴干、烘干)处理,丹参酮ⅡA 含量随干燥温度的升高而显著升高,这与丹参药材中水分的散失有关.在高温下药材中的水分急剧蒸发,从而造成了有效成分含量相对升高.另外,丹参根皮层中含有一定量的粘液质,阴干处理时,药材干燥不充分,在进行粉碎操作时易发生粘连成团现象,这会使丹参根皮部组织不易过筛(丹参药材检测用粉末要求过3号筛),丹参根中丹参酮ⅡA 主要分部于皮部[8- 9],因此造成丹参酮ⅡA 含量降低0而烘干处理的丹参药材,干燥彻底,粉碎时不会发生粘连,最终粉末95%以上均能通过3 号筛,因此丹参酮ⅡA 含量较高.
4.2 丹酚酸B
丹酚酸类化合物都具有邻苯二酚及Ar-CH=CH-COOR 结构,其酚羟基在高温下极易氧化[10-11].因此,烘干时,随着温度的升高,丹酚酸类化合物被破坏,造成丹酚酸B 含量急剧下降,100℃烘干处理组样品中甚至检不出丹酚酸B成分.而晒干和阴干处理样品中丹酚酸B 含量均较高,两处理样品间仅有微小差别.
综上所述,虽然烘干处理对于提高丹参酮ⅡA 含量有一定帮助,但高温对丹酚酸B造成了严重破坏.因此,综合考虑各项因素,丹参药材的最佳干燥方法应为阴干.
5 结语
丹参作为传统中药材其应用历史非常悠久,在《神农本草经》中已有记载.近年来,随着对丹参药理药效的深入研究,丹参已被作为抗心脑血管疾病、抗衰老、抗肿瘤等方面的重要用药,丹参的药用价值得到进一步开发,其经济价值也显著提高.但丹参药材加工仍处于比较粗放和随意的状况,目前国内对丹参药材初加工方面的报道很少.本研究确立了丹参干燥的最佳方法——阴干,为制订丹参药材生产SOP 提供了数据支撑,对丹参药材生产具有一定的指导意义.
参考文献:
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[11] 富志军,林以宁,亢俊伟.浓缩、精制及干燥对复方丹参提取液中水溶性成分的影响[J].安徽中医学院学报,2003,22(2):52- 54. （来源：中国制药设备网 中华干燥网 邓寒霜, 高宝云, 王新军, 李筱玲）
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